蔗糖磷酸化酶（SP）試劑盒說(shuō)明書 技術(shù)文章
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蔗糖磷酸化酶（Sucrose Phosphorylase,SP）試劑盒
商品貨號(hào)：QS2508
英文名稱：Sucrose Phosphorylase (SP) Assay Kit
別名：蔗糖磷酸化酶試劑盒 蔗糖磷酸化酶測(cè)試盒
檢測(cè)方法：常量法
| 商品貨號(hào)： | 商品品牌： | 規(guī)格 | 基本售價(jià) | 選擇規(guī)格 |
|---|---|---|---|---|
| QS2508-50管/48樣 | 索橋生物 | 50管/48樣 | ￥1600.00元 |
- 產(chǎn)品詳細(xì)介紹
測(cè)定意義：
SP(EC2.4.1.7)主要存在于微生物和植物中，裂解葡萄糖苷鍵，催化葡萄糖基轉(zhuǎn)移到果糖、木糖、半乳糖和鼠李糖等，合成相應(yīng)的葡萄糖基低聚糖。此外，SP還能催化氫醌合成熊果苷，具有*的美白效果，在化妝品工業(yè)中具有重要應(yīng)用。
測(cè)定原理：
SP能夠以磷酸為受體，催化蔗糖產(chǎn)生1-磷酸葡萄糖，在葡萄糖磷酸變位酶催化下變位為6-磷酸葡萄糖，在6-磷酸葡萄糖脫氫酶作用下還原NADP+生成NADPH，導(dǎo)致340nm光吸收值增加。測(cè)定340nm吸光度增加速率，即可計(jì)算SP活性。
- 產(chǎn)品說(shuō)明書
貨號(hào)：QS2508 規(guī)格：50 管/48 樣
蔗糖磷酸化酶（Sucrose Phosphorylase,SP）試劑盒說(shuō)明書 紫外分光光度法
注意：正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義： SP(EC2.4.1.7)主要存在于微生物和植物中，裂解葡萄糖苷鍵，催化葡萄糖基轉(zhuǎn)移到果糖、 木糖、
半乳糖和鼠李糖等，合成相應(yīng)的葡萄糖基低聚糖。此外，SP 還能催化氫醌合成熊果苷， 具有*的美白效果，在化妝品工業(yè)中具有重要應(yīng)用。
測(cè)定原理：
SP 能夠以磷酸為受體，催化蔗糖產(chǎn)生 1-磷酸葡萄糖，在葡萄糖磷酸變位酶催化下變位為 6-磷酸葡萄糖，在 6-磷酸葡萄糖脫氫酶作用下還原 NADP+生成 NADPH，導(dǎo)致 340nm 光吸收值增 加。測(cè)定 340nm 吸光度增加速率，即可計(jì)算 SP 活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器： 天平、低溫離心機(jī)、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計(jì)、1 mL 石英比色皿和蒸餾水。
試劑組成和配制：
提取液：液體 50mL×1 瓶，4℃保存。 緩沖液：液體 40mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 25mL×1 瓶，4℃保存。
試劑二：液體 2mL×1 支，4℃保存。
試劑三：液體 1mL×1 支，4℃保存。
試劑四：粉劑×1 瓶，-20℃避光保存，臨用前加 5mL 雙蒸水溶解。
試劑五：粉劑×1 瓶，-20℃避光保存，臨用前加 5mL 雙蒸水溶解。
試劑六：粉劑×1 瓶，-20℃避光保存，臨用前加 10mL 雙蒸水溶解。
試劑七：粉劑×1 瓶，-20℃避光保存，臨用前加 10mL 雙蒸水溶解。
粗酶液提?。?
1. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加 入 1mL 提取液）進(jìn)行冰浴勻漿，然后 10000g，4℃，離心 10min，取上清待測(cè)。
2. 細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬(wàn)細(xì)胞加入 1mL 提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時(shí) 間 3min）；然后 10000g，4℃，離心 10min，取上清置于冰上待測(cè)。
測(cè)定操作表：
對(duì)照管 測(cè)定管
緩沖液（μ L） 850 650
試劑一（μ L） 500 500
試劑二（μ L） 30 30
試劑三（μ L） 20 20
試劑四（μ L） 100 100
試劑五（μ L） 100 100
試劑六（μ L） 200 200
試劑七（μ L） 200 200
混勻，37℃水浴預(yù)熱 5min
樣本（μ L） 200
迅速混勻，于 1mL 石英比色皿，對(duì)照管調(diào)零，測(cè)定 340nm 的初始值 A1，測(cè)定完立 即放入 37℃水浴準(zhǔn)確反應(yīng) 2min，迅速測(cè)定 340nm 吸光值 A2，△A= A2- A1。
SP 活性計(jì)算公式：
1. 按照蛋白濃度計(jì)算
酶活定義：37℃，pH6.8 時(shí)，每毫克蛋白質(zhì)每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol NADPH 為一個(gè)酶活單位。
SP 活性（nmol/min/mg prot）= △A / (s × d) ×V 反總÷V 樣÷Cpr÷T=804×△A÷Cpr
2. 按照樣本質(zhì)量計(jì)算 酶活定義：37℃，pH6.8 時(shí)，每克樣本每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol NADPH 為一個(gè)酶活單位。
SP 活性（nmol/min/g 鮮重）= △A / (s × d) ×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×W)÷T=804×△A÷W
3. 按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算
酶活定義：37℃，pH6.8 時(shí)，每 104個(gè)細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol NADPH 為一個(gè)酶活單位。
SP 活性（nmol/min/104 cell）= △A / (s × d) ×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×細(xì)胞數(shù)量（萬(wàn)個(gè)）)÷T=804× △A÷細(xì)胞數(shù)量（萬(wàn)個(gè)）
s：NADPH 摩爾消光系數(shù)，6220 L/mol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V 反總：反應(yīng)體系總體積， 2mL；V 樣：反應(yīng)體系中樣本體積，0.2mL；W：樣本質(zhì)量，g；Cpr：蛋白濃度，mg/mL；T：反 應(yīng)時(shí)間，2min
注意事項(xiàng)：
1. 粉劑-20℃保存，配制好的試劑 3 天內(nèi)使用完。
2. 可選用 BCA 法測(cè)定蛋白含量試劑盒測(cè)定蛋白含量。
系列產(chǎn)品及單價(jià)
| 輔酶Ⅱ系列 | ||||
| QS1100 | 輔酶ⅡNADP(H)含量測(cè)試盒 | 可見分光光度法 | 50管/24樣 | 550 |
| MS1100 | 輔酶ⅡNADP(H)含量測(cè)試盒 | 微量法 | 100管/48樣 | 1000 |
| QS1101 | NADP磷酸酶（NADPase）測(cè)試盒 | 可見分光光度法 | 50管/48樣 | 520 |
| MS1101 | NADP磷酸酶（NADPase）測(cè)試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 980 |
| QS1102 | 6-磷酸葡萄糖脫氫酶（G6PDH）/葡萄糖-6-磷酸脫氫酶測(cè)試盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | 160 |
| MS1102 | 6-磷酸葡萄糖脫氫酶（G6PDH）/葡萄糖-6-磷酸脫氫酶測(cè)試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 300 |
| QS1103 | 胞漿異檸檬酸脫氫酶（ICDHc）測(cè)試盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | 260 |
| MS1103 | 胞漿異檸檬酸脫氫酶（ICDHc）測(cè)試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 500 |
| QS1104 | NADP蘋果酸酶（NADP-ME）測(cè)試盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | 320 |
| MS1104 | NADP蘋果酸酶（NADP-ME）測(cè)試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 600 |
| QS1105 | NAD-蘋果酸酶（NAD-ME）測(cè)試盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | 350 |
| MS1105 | NAD-蘋果酸酶（NAD-ME）測(cè)試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 650 |
| QS1106 | 6-磷酸葡糖糖酸脫氫酶（6PGDH）測(cè)試盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | 750 |
| MS1106 | 6-磷酸葡萄糖酸脫氫酶（6PGDH）測(cè)試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 1400 |
| QS1107 | 肌酸激酶(CK)測(cè)試盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | 820 |
| MS1107 | 肌酸激酶(CK)測(cè)試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 1500 |
| QS1108-10 | 脂肪酸合成酶（FAS）測(cè)試盒 | 紫外分光光度法 | 10管/9樣 | 1200 |
| QS1108-25 | 脂肪酸合成酶（FAS）測(cè)試盒 | 紫外分光光度法 | 25管/24樣 | 2000 |
| QS1108-50 | 脂肪酸合成酶（FAS）測(cè)試盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | 3200 |
| MS1108 | 脂肪酸合成酶（FAS）測(cè)試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 6000 |
| QS2508 | 蔗糖磷酸化酶(SP)測(cè)試盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | 1600 |
| MS2508 | 蔗糖磷酸化酶(SP)測(cè)試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 3000 |
| QS1110 | 硫氧還蛋白氧化還原酶（TrxR）測(cè)試盒 | 可見分光光度法 | 50管/48樣 | 250 |
| MS1110 | 硫氧還蛋白氧化還原酶（TrxR）測(cè)試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 450 |
| QS1111 | 谷胱甘肽還原酶（GR）測(cè)試盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | 260 |
| MS1111 | 谷胱甘肽還原酶（GR）測(cè)試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 500 |